血清淀*酶活性檢測試劑盒淀粉

產(chǎn)品簡介：

血清淀*酶活性檢測試劑盒淀粉
有效期
6個月
儲存條件
2-8℃
單位
盒
英文名稱
Serum Amylase（AMY）Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號：BC5050-50T/24S

更新時間：2024-07-07

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：993

服務熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

血清淀*酶（AMY）活性檢測試劑盒（碘-淀粉比色法）說明書

可見分光光度法

貨號：BC5050

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體60mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三A	粉劑×1支	2-8℃保存
試劑三B	粉劑×1瓶	2-8℃保存
標準品	粉劑×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

1、試劑一：臨用前加入25mL試劑二，置于常溫水中并加熱至煮沸，期間不斷攪拌粉劑至溶解；用不完的試劑2-8℃保存1個月。

2、試劑三的配制：將試劑三A倒入試劑三B中，用蒸餾水定容至20mL，2-8℃避光保存一個月。

3、標準品：10mg淀粉標準品。臨用前加10mL試劑二，置于常溫水中并加熱至煮沸，配成1mg/mL淀粉標準液。用不完的試劑2-8℃保存1個月。

產(chǎn)品說明：

血清淀*酶( Serum amylase， AMY) 屬于α-淀*酶，以無規(guī)則方式水解多糖分子內(nèi)部的α-1,4糖苷鍵，生成寡聚糖、麥芽糖和葡萄糖的混合物。AMY主要由唾液腺和胰腺分泌，另外近端十二指腸、肺、子宮、泌乳期的乳腺等器官也有少量分泌。

AMY催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解，產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等，碘可以與未被水解的淀粉結(jié)合，生成在570nm下有特征吸收峰的復合物，其深淺可計算出淀*酶的活力單位。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、恒溫水浴鍋/培養(yǎng)箱、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。

操作步驟：

一、 粗酶液提取

取100μL血清和400μL蒸餾水混合（即將血清稀釋5倍），分為2管250μL分別作為測定管和對照管。若實驗后所測數(shù)值偏大或者偏小，可以調(diào)整稀釋比例（比如數(shù)值偏小可以將200μL血清和300μL蒸餾水混合即將血清稀釋2.5倍）

二、 測定步驟和加樣表

1、分光光度計預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至570nm，蒸餾水調(diào)零。

2、將淀粉標準液用蒸餾水稀釋為0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625mg/mL的標準溶液。

3、按操作表依次加入各試劑：

試劑（μL）	測定管	對照管	空白管1	標準管	空白管2
血清稀釋液	250	250	-	-	-
蒸餾水	-	-	250	-	250
標準溶液	-	-	-	250	-
試劑一	500	-	500	-	-
試劑二	-	500	-	500	500
在37℃恒溫水浴中準確保溫10min
試劑三	250	250	250	250	250

混勻后于15min內(nèi)測定570nm處測定管、對照管、空白管1、標準管、空白管2的吸光度，分別記為A測定、A對照、A空白1、A標準和A空白2，計算ΔA測定=（A空白1-A空白2）-（A測定-A對照），ΔA標準=A標準-A空白2。標準曲線、空白管1、空白管2做1-2次即可。

三、AMY活性計算

1、標準曲線的繪制

以ΔA標準為y軸，以標準溶液濃度為x軸，繪制標準曲線，得到方程y=kx+b。將ΔA測定帶入方程得到x（mg/mL）。

2、按照血清體積計算：

單位定義：每mL血清每分鐘消耗1mg淀粉定義為1個酶活性單位。

AMY活性 (U/mL)= x×V樣÷V樣÷T×F =0.1×x×F

V樣：加入反應體系中樣本體積，0.25 mL；T：反應時間，10min；F：稀釋倍數(shù)。

注意事項：

1. ΔA測定大于1.5時，可以對樣本進行適當稀釋后測定。

2. 反應完成后需在15min內(nèi)測定吸光度。

實驗實例：

1、取100μL牛血清和400μL蒸餾水混合（即血清稀釋5倍）后，按照測定步驟操作，計算ΔA測定= （A空白1-A空白2）-（A測定-A對照）=（1.137-0.029）-（0.986-0.012）=0.134，帶入標準曲線y=1.9683x+0.0082，計算x=0.0639，按公式計算活性：

AMY（U/mL）=0.1×x×F =0.1×0.0639×5=0.0320 U/mL。

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血清淀*酶活性檢測試劑盒 淀粉有效期6個月儲存條件2-8℃單位盒英文名稱Serum Amylase（AMY）Activity Assay Kit檢測方法可見分光光度法 Spectrophotometer規(guī)格50T/24S

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