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當前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法離子系列BC5640-50T/48S血清銅含量檢測試劑盒 離子

血清銅含量檢測試劑盒 離子
產(chǎn)品簡介:

單位

中文名稱
血清銅含量檢測試劑盒 離子
有效期
6個月
儲存條件
2-8℃
英文名稱
Serum Copper Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號:BC5640-50T/48S

更新時間:2024-04-23

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1289

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

血清銅離子(Cu)含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號:BC5640

規(guī)格:50T/48S

產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

液體45mL×1瓶

2-8℃保存

試劑二

液體15mL×1瓶

2-8℃保存

標準品

液體1mL×1支

2-8℃保存

溶液的配制:

1. 試劑一:若有試劑析出,置于37℃水浴溶解即可。

2. 標準品:10mmol/L(即10000µmol/L)硫酸銅標準液。

產(chǎn)品說明:

銅是人體必需的微量元素之一,是許多酶的重要組成成分,它可以和蛋白質(zhì)結(jié)合形成銅蛋白,具有保護細胞的功能;血漿中的銅大部分與球蛋白結(jié)合形成銅藍蛋白,對紅細胞的生成具有重要作用。因此,測定血清銅可知體內(nèi)是否缺銅。

在酸性條件下,Cu2+從銅藍蛋白和清蛋白中解離出來,與絡(luò)合劑3,5-二溴-PAESA反應(yīng),產(chǎn)生紫色絡(luò)合物,在580nm處有特征吸收峰,在一定范圍內(nèi)吸光度與濃度成正比,從而計算出Cu2+濃度。

注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)

血漿/血清:直接測定。若有渾濁請離心后取上清置于冰上待測。(注意:血漿樣本不能用EDTA作為抗凝劑,建議使用肝素作為抗凝劑)。

二、測定步驟

1、 可見分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至580nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 80µmol/L標準溶液配制:取100µL 10mmol/L的標準液加入400μL 蒸餾水混勻,即2000µmol/L的標準品;再取40μL 2000µmol/L的標準品和960μL 蒸餾水混合,即配成80µmol/L標準溶液。

3、 實驗前根據(jù)樣本量取部分試劑一37℃預(yù)熱10min

4、 操作表:(在1.5mLEP管中依次加入以下試劑)

 

試劑名稱(μL

空白管

測定管

標準管

蒸餾水

50

-

-

樣本

-

50

-

標準品

-

-

50

試劑一

750

750

750

試劑二

250

250

250

充分混勻,37℃孵育5min,取反應(yīng)液于1mL玻璃比色皿中,立即測定580nm處吸光值A,記為A空白、A測定、A標準,計算ΔA測定=A測定-A空白,ΔA標準=A標準-A空白??瞻坠芎蜆藴使苤恍铚y1-2次。

三、血清銅離子(Cu)含量的計算

血清銅離子(Cu)含量(μmol/L)=ΔA測定÷ΔA標準÷C標準)=80×ΔA測定÷ΔA標準

C標準:標準品濃度,80µmol/L。

注意事項:

1. 37℃孵育5min后請立即測定吸光度,若樣本數(shù)量過多,可分批次測定,盡量確保在20min內(nèi)完成測定。

2. 如果樣本測定吸光值大于0.5,建議將樣本用蒸餾水稀釋后進行測定,注意同步修改計算公式。

3. 如果樣本測定吸光值小于0.005或接近空白管吸光值,可適當增大樣本量,空白管和標準管也需要進行相應(yīng)調(diào)整。

實驗實例:

1. 取馬血清50μL,按照測定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A測定-A空白=0.125-0.071= 0.054,ΔA標準=A標準-A空白=0.384-0.071=0.313,計算含量得:

血清銅離子含量(μmol/L)=80×ΔA測定÷ΔA標準=13.802μmol/L

2. 取人血清50μL,按照測定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A測定-A空白=0.169-0.071= 0.098,ΔA標準=A標準-A空白=0.384-0.071=0.313,計算含量得:

血清銅離子含量(μmol/L)=80×ΔA測定÷ΔA標準=25.048μmol/L

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