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NAD-蘋(píng)果酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
NAD-蘋(píng)果酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
NAD-Malate Dehydrogenase(NAD-MDH) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào):BC1040-50T/48S

更新時(shí)間:2024-04-24

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :1758

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產(chǎn)品介紹

NAD-蘋(píng)果酸脫氫酶(NAD-MDH)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
紫外分光光度法
貨號(hào):BC1040
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體50 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體40 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×2-20℃保存
試劑三粉劑×2-20℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前加入360 μL雙蒸水,用不完的試劑仍-20℃保存;

  2. 試劑三:臨用前加入327 μL雙蒸水,用不完的試劑仍-20℃保存。

具體操作步驟詳和產(chǎn)品說(shuō)明 見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。

注意事項(xiàng):

  1. 粗酶液的提取必須在0℃- 4℃中操做完成,以防止酶變性失活。

  2. 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑二、試劑三和樣本在冰上放置,以免變性和失活。

  3. 當(dāng)初始讀值小于0.7或者ΔA大于0.5時(shí)建議稀釋后測(cè)量。

  4. 建議一人加樣一人比色。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.05g大鼠肝臟加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.917-0.293=0.624ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.789-0.784=0.005,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得: NAD-MDH(U/g 質(zhì)量)=6431×(ΔA測(cè)定-ΔA空白) ÷W=6431×0.619 ÷0.05=79616 U/g 質(zhì)量。

  2. 取0.05g柳樹(shù)葉加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.812-0.741=0.071,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.789-0.784=0.005,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活: NAD-MDH(U/g 質(zhì)量)=6431×(ΔA測(cè)定-ΔA空白) ÷W=6431×0.066 ÷0.05=8489 U/g 質(zhì)量。

  3. 取20μL小鼠血漿直接按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.855-0.789=0.066,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.789-0.784=0.005,按血清/血漿體積計(jì)算酶活得: NAD-MDH(U/mL=6431×(ΔA測(cè)定-ΔA空白)=6431×0.061=392 U/mL。

參考文獻(xiàn):

  1. Yao Y X, Li M, Zhai H, et al. Isolation and characterization of an apple cytosolic malate dehydrogenase gene reveal its function in malate synthesis[J]. Journal of plant physiology, 2011, 168(5): 474-480.

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