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纖維素酶(CL)活性檢測試劑盒 微量法
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
2-8℃
纖維素酶(CL)活性檢測試劑盒 微量法
有效期
6個月
單位

英文名稱
Cellulase(CL) Activity Assay Kit
別名
纖維素酶試劑盒(羧甲基纖維素酶) CL Kit 纖維素酶(CL)試劑盒(羧甲基纖維素酶) 纖維素酶(CL)測試盒
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S

產(chǎn)品型號:BC2545-100T/48S

更新時間:2024-04-11

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :846

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產(chǎn)品介紹


纖維素酶(CL)活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC2545
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體5 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體5 mL×1瓶2-8℃保存
標準品粉劑×12-8℃保存

溶液的配制:
標準品:10mg無水*萄糖(干燥失重<0.2%)。臨用前加入1mL蒸餾水溶解,配制成10mg/mL葡萄糖溶液備用,2-8℃保存兩周,或者用飽和苯甲酸溶液溶解,可保存更長時間。
產(chǎn)品說明:
CL(EC 3.2.1.4存在于細菌、真菌和動物體內(nèi),能夠催化纖維素降解,是一類可廣泛應用于醫(yī)藥、食品、棉紡、環(huán)保及可再生資源利用等領域的酶制劑。
采用3,5-二硝基水楊酸法測定CL催化纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、低溫離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)

  1. 細菌或細胞:收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲冰浴破碎細菌或細胞(功率200w,超聲3秒,間隔10秒,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

  2. 組織:稱取約0.1g組織加入1mL提取液,冰浴中勻漿。8000g ,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

二、測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,分光光度計蒸餾水調(diào)零。
2、標準品的準備:將標準品用蒸餾水稀釋至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0mg/mL。
 

序號稀釋前濃度(mg/mL)標準液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(mg/mL)
1101009001
21160400.8
31120800.6
41801200.4
51401600.2
61201800.1
7102000

實驗中每個標準管需15µL標準溶液。
3、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑): 

試劑名稱(μL對照管測定管標準管
試劑一5050
試劑二200200-
蒸餾水5050-
樣本-50-
煮沸的樣本50--
混勻,40℃準確水浴30min,取出后立即放入沸水中煮沸15min,得糖化液
糖化液1515-
標準液--15
試劑三353535
混勻, 沸水浴顯色15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻
蒸餾水250250250
混勻,取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中測定吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管,ΔA標準=A標準-A(0 mg/mL)。標準曲線只需做1-2次。


相關發(fā)表文獻:
Guo Q, Du G, Qi H, et al. A nematicidal tannin from Punica granatum L. rind and its physiological effect on pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus)[J]. Pesticide biochemistry and physiology, 2017, 135: 64-68.
參考文獻:
Faria M L, Kolling D, Camassola M, et al. Comparison of Pennicillium echinulatum and Trichoderma reesei cellulases in relation to their activity against various cellulosic substrates[J]. Biores. Technol, 2008, 99: 1417-1424.
相關系列產(chǎn)品:
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