輔酶ⅡNADP(H)含量檢測試劑盒
有效期
6個月
儲存條件
-20℃
單位
盒
英文名稱
CoenzymeⅡ NADP(H) Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號：BC1100

更新時間：2025-08-25

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：2013

服務熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

實驗室耗材的采購與管理：降低成本，提高效率

DTT（二硫蘇糖醇）的作用

產(chǎn)品介紹

輔酶II NADP(H)含量檢測試劑盒（MTT顯色法）說明書
可見分光光度法
貨號：BC1100
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
酸性提取液	液體15 mL×1瓶	2-8℃保存
堿性提取液	液體15 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體20 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1支	-20℃保存
試劑三	液體12mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四A	粉劑×1支	-20℃保存
試劑四B	液體5mL×1瓶	2-8℃保存
試劑五	液體40 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑六	液體70 mL×1瓶	2-8℃保存
NADP標準品	粉劑×1支	-20℃保存
NADPH標準品	粉劑×1支	-20℃保存

溶液的配制：

試劑二：臨用前加入6mL蒸餾水充分混勻，溶解后2-8℃保存4周。
試劑四：臨用前將試劑四A溶解到試劑四B中，溶解后分裝保存，避免反復凍融，-20℃保存4周。
NADP標準品：臨用前加入 1.27 mL 蒸餾水，即 5 µmol/mL，-20℃可以保存2周。
NADPH標準品：臨用前加入 1.2 mL 蒸餾水，即 5 µmol/mL，-20℃可以保存2周。

產(chǎn)品說明：
輔酶Ⅱ NADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，NADP⁺和 NADPH 含量測定可以計算 NADP（NADPH + NADP⁺)含量和 NADPH/NADP⁺比值，其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。NADPH/NADP⁺比值不僅是細胞氧化還原態(tài)的主要標志之一，而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP⁺和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用，使氧化型噻唑藍（MTT）還原為甲瓚，570nm下檢測吸光值，從而測定 NADPH 含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP⁺為NADPH，從而檢測NADP⁺含量。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、研缽/勻漿器、超聲破碎儀、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項：

如果一次性測定樣本數(shù)較多，可將試劑一、二、三按比例配成混合液。
反應過程中注意避光。
由于每一個測定管需要設一個對照管，本試劑盒50管可以測定24個NADP⁺或NADPH。

如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。

實驗實例：

NADP⁺的測定：稱取 0.1g 綠蘿葉片，按提取步驟提取后按照測定步驟操作，玻璃比色皿測得吸光值后計算 ΔA 測定= A₂- A₁=0.092-0.036=0.056，標準曲線y₁=0.531x+0.0266，根據(jù)標曲得出x₁=0.055，NADP⁺含量得：NADP⁺ (nmol/g 質(zhì)量）= x₁÷W=0.55 nmol/g 質(zhì)量。

NADPH的測定：稱取 0.1g 綠蘿葉片，按提取步驟提取后按照測定步驟操作，玻璃比色皿測得吸光值后計算 ΔA 測定=A測定-A對照= A₂’- A₁’=0.046-0.012=0.034，標準曲線y₂=0.332x+0.0136，根據(jù)標曲得出x₂=0.061，NADPH含量得：NADPH (nmol/g 質(zhì)量）= x₂÷W=0.614 nmol/g 質(zhì)量。

NADP⁺的測定：稱取 0.1g 大兔肝臟，按提取步驟提取后按照測定步驟操作，玻璃比色皿測得吸光值后計算 ΔA 測定= A₂- A₁=0.217-0.108=0.109，標準曲線y₁=0.531x+0.0266，根據(jù)標曲得出x₁=0.155，NADP⁺含量得：NADP⁺ (nmol/g 質(zhì)量）= x₁÷W=1.55 nmol/g 質(zhì)量。

NADPH的測定：稱取0.1g 大兔肝臟，按提取步驟提取后按照測定步驟操作，玻璃比色皿測得吸光值后計算 ΔA 測定=A測定-A對照= A₂’- A₁’=0.085-0.008=0.077，標準曲線y₂=0.332x+0.0136，根據(jù)標曲得出x₂=0.191，NADPH含量得：NADPH (nmol/g 質(zhì)量）= x₂÷W=1.91 nmol/g 質(zhì)量。

NADP⁺的測定：取0.1mL馬血清，按提取步驟提取后按照測定步驟操作，玻璃比色皿測得吸光值后計算 ΔA 測定= A₂- A₁=0.055-0.026=0.029，標準曲線y₁=0.531x+0.0266，根據(jù)標曲得出x₁=0.005，NADP⁺含量得：NADP⁺ （nmol/mL）= 11 x₁=0.050 nmol/mL。

NADPH的測定：取0.1mL馬血清，按提取步驟提取后按照測定步驟操作，玻璃比色皿測得吸光值后計算 ΔA 測定=A測定-A對照= A₂’- A₁’=0.028-0.012=0.016，標準曲線y₂=0.332x+0.0136，根據(jù)標曲得出x₂=0.007，NADPH含量得：NADPH（nmol/mL）=11 x₂=0.080 nmol/mL。
標準溶液稀釋表
NADP⁺標準品稀釋表 NADPH 標準品稀釋表

序號	稀釋前濃度（nmol/mL）	標準液體積（µL）	蒸餾水體積（µL）	稀釋后濃度（nmol/mL）	序號	稀釋前濃度（nmol/mL）	標準液體積（µL）	蒸餾水體積（µL）	稀釋后濃度（nmol/mL）
1	5000	10	990	50	1	5000	10	990	50
2	50	100	900	5	2	50	100	900	5
3	5	200	600	1.25	3	5	200	200	2.5
4	1.25	200	200	0.625	4	2.5	200	200	1.25
5	0.625	200	200	0.3125	5	1.25	200	200	0.625
6	0.3125	200	200	0.15625	6	0.625	200	200	0.3125
7	0.15625	200	200	0.078	7	0.3125	200	200	0.15625
8	0.078	200	200	0.039	8	0.15625	200	200	0.078
9	0.039	200	200	0.0195	9	0	200	200	0
10	0.0195	200	200	0.01
11	0	0	200	0